組織切片的免疫熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)

更新時(shí)間：2023-12-21 點(diǎn)擊次數(shù)：437

免疫熒光標(biāo)記技術(shù)（immunofluorescence technique）是將已知的抗體或抗原分子標(biāo)記上熒光素，當(dāng)與其相對(duì)應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時(shí)，在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就可以看見發(fā)出熒光的抗

原抗體結(jié)合部位，檢測(cè)出抗原或抗體。

實(shí)驗(yàn)材料

組織樣品

試劑、試劑盒

PBS 抗體

儀器、耗材

玻片加濕盒

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。

2. 待載玻片達(dá)室濕且未干時(shí)，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。

3. 稀釋的第一杭體于4℃用微量離心機(jī)以13 500 g 離心2 min（每一載玻片上加40~50 μl 抗體，應(yīng)能蓋住切片）。

4. 用與泵相連的巴斯德吸管，在切片的一端吸去玻片上的PBS，并從另一端加上抗體，蓋上加濕盒，室溫溫育1 h。