簡要描述:細胞活性實驗:細胞活性是進行細胞生物學實驗的一項重要指標,是評價細胞培養(yǎng)、細胞毒性及生理研究的基礎。
詳細介紹
細胞活性的定義具有多樣性,通過對關鍵的細胞生理指標進行標記來進行檢測,如細胞代謝的活性(酯酶的功能,MTT法)、凋亡標記物(Annexin V)、細胞氧化還原電位、膜電位、增值率(DNA含量)、線粒體功能和膜的完整性等。雖然有如此多的指標參數(shù),但是基于對細胞膜的完整性和相關的染料排斥發(fā)檢測,已經被廣泛的認為是作為細胞活性檢測的標準。應用*廣泛的細胞膜完整性的檢測方法是臺盼藍染色法,該法*早是基于顯微鏡下觀測并且手工計數(shù),過程費事費力,并且計數(shù)的系統(tǒng)誤差較大。為了排除人工計數(shù)的誤差,增加計數(shù)過程的準確性,出現(xiàn)了基于儀器放大、拍照計數(shù)的方法。這樣提高了計數(shù)過程的自動化程度,但是依舊無法擺脫由于計數(shù)時焦平面的選擇、顆粒識別的準確性問題,并且容易高估細胞活性。為了解決這些問題,一些熒光染料被發(fā)明進行使用。該法能夠較臺盼藍染色提高100倍或者更高的檢測準確性與靈敏度。這類型的熒光染料中,碘化丙啶(Propidium Iodidi,PI)是應用廣泛的一種標準染料。
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