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1，什么是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染？瞬時(shí)轉(zhuǎn)染：外源片段的表達(dá)時(shí)間短暫。這主要是因?yàn)橥庠磳?dǎo)入的裸露的載體整合入基因組的幾率非常低，所以以染色體外(episomal)形式存在，不能隨細(xì)胞分裂而一同復(fù)制導(dǎo)致最后拷貝數(shù)被稀釋導(dǎo)致的。而且考慮到細(xì)胞分裂會稀釋質(zhì)粒的量，所以起初轉(zhuǎn)染的質(zhì)?？截悢?shù)*。這就導(dǎo)致瞬時(shí)轉(zhuǎn)染呈現(xiàn)一個高拷貝到低拷貝迅速降低的過程，且無法在這個系統(tǒng)上實(shí)現(xiàn)可誘導(dǎo)表達(dá)。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：是相對瞬時(shí)轉(zhuǎn)染而言，進(jìn)入細(xì)胞的質(zhì)粒整合入細(xì)胞基因組中，并能隨細(xì)胞分裂穩(wěn)定傳遞下去。在這個系統(tǒng)中，質(zhì)粒表...

肝纖維化動物模型化學(xué)性損傷法：雄性Wistar大鼠，體重130g左右，用硫代乙酰胺腹腔內(nèi)注射，第1次20mg/100g體重，從第二次起12mg/100g體重，每周注射2次，共8周。評價(jià):第3周，在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細(xì)胞變性壞死和炎細(xì)胞浸潤，炎細(xì)胞浸潤、壞死細(xì)胞數(shù)和程度超過豬血清模型。6周后出現(xiàn)增生纖維束，纖維增生晚于和少于豬血清模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。肝纖維化動物模型四氯化碳法：180～200gWistar或SD大鼠，皮下注射40%-50%CC...

.將水迷宮加入適當(dāng)?shù)乃?，水溫控制?5±1℃。2.實(shí)驗(yàn)前把動物帶入實(shí)驗(yàn)室中熟悉環(huán)境。3.設(shè)置軟件。4.第一階段：（定位航行）將小鼠頭對著墻壁依次放入四個象限水迷宮進(jìn)行實(shí)驗(yàn)（所有大鼠需全部做完后換下一象限）。若動物在60s內(nèi)登上平臺區(qū)域，則錄像結(jié)束。若動物在60s內(nèi)未登上平臺區(qū)域，則用木棍指引大鼠游上平臺，并停留30s。每只小鼠每天訓(xùn)練4次，訓(xùn)練天數(shù)為5天。5.每只動物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需用干毛巾擦拭，必要時(shí)需要使用電吹風(fēng)吹干。6.第二階段（空間探索）：待第一到第四象限全...

科研實(shí)驗(yàn)優(yōu)勢：1.獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室和動物中心：實(shí)驗(yàn)室面積600多平方米，動物中心1000平方米，公司目前具備較好的的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺，能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)；2.專業(yè)的技術(shù)人員：技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人，核心研究員（碩士）15人；科研實(shí)驗(yàn)介紹：1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq3.蛋白質(zhì)組學(xué)：...

大鼠腦缺血再灌注損傷模型模型：麻醉大鼠，然后在頸部中線切開一個切口，暴露頸外動脈和頸內(nèi)動脈，用無菌縫合線結(jié)扎，血管夾夾住頸內(nèi)動脈。隨后在頸總動脈上切口，然后插入線栓。2h后，大鼠進(jìn)行再灌注。模型大鼠成功構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)：大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱，對側(cè)前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評分在1-3分，48小時(shí)內(nèi)沒有死亡，就認(rèn)為模型成功。文獻(xiàn)上用的是2-3分的模型。優(yōu)點(diǎn)：無需開顱，創(chuàng)傷較??；缺血部位相對固定，可控性好；可實(shí)現(xiàn)腦缺血后再灌注，是理想的標(biāo)準(zhǔn)局灶性腦缺血動物模型。動物選擇：目前多...

染色原理：所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理不陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)：分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而，淡綠或苯胺藍(lán)的分子量都很大，因此Masson染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍(lán)色(苯胺藍(lán))，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。Masson染色特點(diǎn)：1、染色穩(wěn)定2、分化時(shí)間短，1～2s3、色彩清晰鮮艷4、適用范圍廣，適宜于組織的石...

進(jìn)行分子實(shí)驗(yàn)檢測時(shí)需要先準(zhǔn)備PCR反應(yīng)混合物：根據(jù)DNA樣本的數(shù)量來確定除了DNA外其他混合物的體積（額外增加一份來確保有足夠的PCR反應(yīng)混合物），將擴(kuò)增每一個遺傳標(biāo)記并且在每一個PCR反應(yīng)管內(nèi)分19.5uL的反應(yīng)混合物。配制膠溶液：將25g尿素、7.5mL40%丙烯酰胺：PDA(19:1)加入到250mL的錐形瓶中。加蒸餾水至50mL，充分混勻來溶解尿素(見注釋4)。準(zhǔn)備制膠板：把膠板洗干凈，確保上面沒有灰塵，用硅化玻璃板。根據(jù)各個廠家的不同把玻璃板夾在一起并且用膠條封住底...