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雄性C57/B6小鼠小鼠常規(guī)麻醉,左胸前部剃毛,消毒。在左胸上方,做一個(gè)小的皮膚切口(1.2cm),并進(jìn)行荷包縫合,然后分離胸大肌和胸小肌后,暴露第4肋間間隙。在第4肋間間隙,用一個(gè)蚊式止血鉗打開(kāi)胸膜和心包;用夾子略微打開(kāi),心臟平穩(wěn)而輕柔地從孔中“彈出”。縫合和結(jié)扎距左冠狀動(dòng)脈前降支起點(diǎn)約3mm的位置;左心室前壁變得蒼白,結(jié)扎被認(rèn)為是成功。結(jié)扎后,立即將心臟放回原位,然后手動(dòng)排空空氣,關(guān)閉肌肉和胸腔皮膚,通過(guò)先前放置的荷包線縫合。在3-5分鐘內(nèi)完成上述過(guò)程。記錄小鼠心電圖,將...
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脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁的主要生物活性成份,已廣泛用于誘導(dǎo)急性肺損傷模型。此模型與人類急性肺損傷的病理特征相似。BALB/c小鼠,18-20g。小鼠常規(guī)麻醉后,模型組氣道內(nèi)滴注3mg/kgLPS(Escherichiacoli055:B5;Sigma),溶解在50μl的生理鹽水中,對(duì)照組小鼠氣管內(nèi)滴注等體積的生理鹽水。藥物進(jìn)入氣道后,立即通過(guò)直立旋轉(zhuǎn)等手段,使藥物均勻分布在肺組織。24小時(shí)后,小鼠犧牲,取血、肺泡灌洗液和肺組...
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一、用左手固定大鼠的頭部,使其頭部和頸部成一直線,方便灌胃針頭進(jìn)入口腔。二、將灌胃針從大鼠的左側(cè)嘴角插入,壓住舌頭,抵住上顎,輕輕向內(nèi)推進(jìn),進(jìn)入食管后會(huì)有一個(gè)刺空感。三、在灌胃針插入過(guò)程中,應(yīng)緊貼咽后壁進(jìn)針,避免損傷食道。若灌胃針進(jìn)入氣管,大鼠會(huì)劇烈掙扎。四、觀察大鼠的反應(yīng),如無(wú)過(guò)度掙扎,可嘗試推注藥物。如阻力過(guò)大或動(dòng)物反應(yīng)劇烈,可退針后插入。五、一般灌胃針插入深度:大鼠4-6cm。六、一次灌胃量:大鼠1-2ml/100g。上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長(zhǎng)江軟件園,公司...
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一、左手固定小鼠,確保其身體成一直線,頭部固定,避免活動(dòng)。二、灌胃針從小鼠左側(cè)嘴角進(jìn)入,壓住舌頭,抵住上顎,輕輕向內(nèi)推進(jìn),進(jìn)入食管后會(huì)有一個(gè)刺空感。三、在灌注藥液時(shí)需注意小鼠是否有強(qiáng)烈掙扎現(xiàn)象。四、一般灌胃針插入深度:小鼠2-3cm。五、一次灌胃量:0.1-0.2ml/10g。上海達(dá)為科生物科技有限公司,位于上海長(zhǎng)江軟件園,公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開(kāi)發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的...
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1.SD大鼠,250g,通過(guò)頸椎脫位處死大鼠,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。2.打開(kāi)皮膚,暴露、收集股骨,無(wú)菌狀態(tài)下移除附著的肌肉和組織。3.并轉(zhuǎn)移股骨至預(yù)冷含雙抗的PBS中,洗滌三次。冰上操作。4.切斷股骨骨骺,使用5mlPBS,1ml注射器針頭沖洗,沖洗液由棕色變成粉紅色即可(股骨變白)。沖洗后,用1ml注射器吹打3-5次。5.70um濾網(wǎng)過(guò)濾,棄去篩網(wǎng)。使用15ml離心管,先加入分離液,然后緩慢加入濾過(guò)的懸液。20℃環(huán)境下,600g離心25min。...
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1.C57小鼠,8-10周,通過(guò)頸椎脫位處死,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。2.使用眼科剪和鑷子,使髖關(guān)節(jié)脫臼,保持股骨頭完整。3.用止血鉗去除每個(gè)股骨頭的軟骨帽,將組織放入含2%雙抗的PBS中。4.用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍,將關(guān)節(jié)軟骨小心移到2ml離心管中。5.用眼科剪刀將軟骨帽剪成約1mm3的碎片,加入3ml預(yù)熱的CollagenaseD(1.5mg/ml)。6.放入37℃、80rpm的搖床中進(jìn)行第一次消化,時(shí)間2h。7.第一次消化結(jié)束...
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1.準(zhǔn)備0-1天內(nèi)的C57BL/6J小鼠新生鼠。2.用溫的無(wú)菌去離子水,輕輕擦拭每只新生鼠。3.用70%的乙醇去除新生鼠身體上的污染物。4.斷頭,取心臟,心臟置于冰的PBSG溶液中。5.除去血液和非心臟組織。6.剪碎心臟組織。7.加入胰酶-膠原酶消化液,每只新生鼠75ul。8.在37°C的搖床培養(yǎng)箱中,以250rpm/5min,消化心肌組織。9.輕輕渦旋,然后離心10秒,丟棄第一次消化的上清液。10.開(kāi)始第二次消化,250rpm/5min后,輕輕渦旋,然后離心10秒,收集上清...
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